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医学分子生物学考试题目及答案之基因氨基酸序

时间:2018-01-09 11:57来源:人科学 作者:千金散人 点击:
回答下列问题:(1)成熟的人IFN-g蛋白的氨基酸数目是多少?(2分) 氨基酸数目为165个 (2)pBV220是一种温敏型质粒(其结构见图) ,请设计一套方案把人IFN-g编码序列插在pBV220的EcoRⅠ和
回答下列问题:(1)成熟的人IFN-g蛋白的氨基酸数目是多少?(2分)

氨基酸数目为165个
(2)pBV220是一种温敏型质粒(其结构见图)

,请设计一套方案把人IFN-g编码序列插在pBV220的EcoRⅠ和BamHⅠ之间

(设计方案包括引物的设计和序列、如何获得IFN-g编码序列、如何构建和筛选重组体等)。
(EcoRⅠ的酶切位点为GAATTC,BamHⅠ的酶切位点为GGATCC)(6分) 

答:(1)引物的设计:上游引物:GAATTCatgaaatatacaagtt,下游引物:GGATCCttactgggatgctcttc   (2分)       
                                           (2)从细胞提取RNA,然后做RT-PCR获得IFN-gcDNA的克隆(1分)
(3)要包含有切、连、转、筛的内容(3分) 
(3)请解释pBV220温敏型质粒热诱导的原理(2分)

PL启动子受CIts857基因的表达产物(阻遏蛋白)的抑制,在较低温度(30度)时阻遏蛋白以活性形式存在,在较高温度时(42度)阻遏作用失活,外源基因表达。 
(责任编辑:千金散人)
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